Pré-cuisez votre agar et réchauffez-le au micro-ondes

Il y a un micro-ondes dans presque tous les laboratoires de biologie moléculaire – alors utilisons-le pour autre chose que quelques gels d'agarose !

Au moment où le travail est sur le point de se terminer au laboratoire, avant de rentrer chez vous, vous voulez rapidement déposer quelques cellules Top-10 transformées. Pas de chance ! Car toutes les plaques d'agar ont été utilisées et, comme toujours, aucun de vos aimables collègues de laboratoire n'a pensé à préparer de nouvelles plaques d'agar. Vous devez donc consacrer de précieuses heures supplémentaires à l'autoclavage.

Pour que vous n'ayez pas à répéter constamment cette tâche ennuyeuse, nous avons élaboré quelques recettes pour précuire et ensuite réchauffer des plaques de gélose prêtes à être utilisées de façon impromptue.

Recette pour une réserve d'urgence de 200 ml d'agar :

Pré-cuisson de la gélose :

• Tout d'abord, la gélose est pesée dans une bouteille de 1 L (nous avons listé trois des recettes les plus fréquemment utilisées).

• La poudre pesée est ensuite mise en suspension dans 1 L d'eau distillée. Le milieu doit être bien mélangé, et si nécessaire, il peut être brièvement chauffé (sur une plaque chauffante) tout en remuant fréquemment.
• Lorsque toute la poudre est complètement dissoute, aliquotez 200 ml du mélange dans une bouteille Duran de 250 ml (utilisez un cylindre de mesure pour cela).
• Remplissez maintenant 4 bouteilles avec 200 ml de milieu dans chacune. Les derniers 200 ml ne sont jamais utilisés (des résidus dans le flacon d'origine empêcheraient un remplissage exact de 200 ml).
• Pour la stérilisation dans l'autoclave, le couvercle ne doit être que légèrement vissé sur le filetage de la bouteille !
• Les milieux gélosés sont maintenant autoclavés à 121°C pendant 20 minutes.
• Après l'autoclavage, les flacons en verre de laboratoire doivent être fermés hermétiquement (pour éviter toute contamination).
• L'agar précuit peut être conservé sans problème pendant une longue période à température ambiante.

Réchauffement au micro-ondes :

Lorsque vous avez besoin de plaques d'agar rapidement, il est facile de prendre une de ces bouteilles de 100 ml précuites et de les faire bouillir au micro-ondes.

• Pour cela, mettez votre flacon dans le micro-ondes avec le couvercle desserré (!) - comme pour l'autoclavage - pendant deux minutes à pleine puissance.
• Dès qu'une mousse commence à se former, sortez brièvement le milieu du micro-ondes et faites tourner le flacon pour dissoudre la mousse.
• Continuez ensuite à chauffer l'agar au micro-ondes jusqu'à ce qu'il soit complètement liquide. L'agar doit bouillir brièvement au moins deux ou trois fois.
• Par précaution, ne touchez le flacon qu'avec des gants de cuisine, sinon vous vous exposez fortement à un risque de brûlure !
• Dès que la gélose est liquide, commencez à la refroidir soigneusement jusqu'à 55 à 65°C en la faisant tourner dans un bain d'eau froide.
• Remuez maintenant tout en ajoutant l'antibiotique requis.
• Vous pouvez alors le verser sur vos plaques.

Conseil : Disposez les plaques pour les faire sécher individuellement au lieu de les empiler (ce qui est souvent la pratique courante), car cela fait sécher la gélose beaucoup plus rapidement !